农药残留量快速检测-酶抑制率法(分光光度法)

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

试剂

*pH8.0缓冲溶液分别取11.9g无水磷酸氢二钾与３.２g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。

*显色剂分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。

*底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。

*乙酰胆碱酯酶根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化ΔA0值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用。